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              產品名稱：
              
        cDNA文庫構建
        
            
        
           	
        
            
        
              產品價格：
              
            
        
          
        
          
        
            
        
              廠商性質：
              工程商
              產品時間：
              2020-11-09
            
        
          
        
            
        cDNA文庫是指某生物某發育時期所轉錄的全部mRNA經反轉錄形成的cDNA片段與某種載體連接而形成的克隆的集合。標準cDNA文庫構建的基本原理是用 Oligo（dT）作逆轉錄引物，或者用隨機引物，給所合成的cDNA加上適當的連接接頭，連接到適當的載體中獲得文庫。
        
            
          
        
          
          
        
          
        

            
        
              
         文庫構建流程：
        1.       樣品QC
         
        2.       從總RNA中分離mRNA（原始文庫將采用至少2 µg mRNA進行構建）
         
        3.       以帶有NotI酶切位點的oligo（dT）Linker Primer為反轉錄引物，再在雙鏈cDNA的5’端加SalII adaptor
         
        4.       NotI酶切、過柱去除小片段
         
        5.       將合成的雙鏈cDNA與載體進行連接，連接產物轉化DH10B感受態細胞
         
        6.       cDNA文庫的QC：檢測庫容量（重組子克隆數目）；隨機挑取30個克隆子進行PCR鑒定和雙向測序分析，檢測含插入片段的克隆子比例，檢測平均插入片段大小
         
        客戶提供
         
                注明樣品的種屬，收集樣品后，應將樣品立即置于干冰保持低溫運輸。
         
        我們提供
         
               含有文庫的甘油菌和質量分析鑒定報告
         
        質量保證
         
              文庫含有至少4 x 106個原始克隆
         
               樣品平均插入片斷保證大于1.0 kb
         
             有超過85%的載體含有插入片段
        
            
            
        
          
        
          
        
          



        

        
	
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